国产中文字幕欧美日韩-亚洲精品中文字幕乱女-性感美女激情诱惑一区-色婷婷综合精品三孕妇

技術(shù)文章/ article

您的位置:首頁  -  技術(shù)文章  -  人類免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV-1 P24)ELISA試劑盒工作原理

人類免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV-1 P24)ELISA試劑盒工作原理

更新時間:2025-01-06      瀏覽次數(shù):288

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人類免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV-1 P24)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷


實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人類免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV-1 P24)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人類免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV-1 P24)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

樣本處理及要求
1.  血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。

試劑盒性能

  1.  檢測范圍:0.25 ng/mL – 8 ng/mL。

  2.  靈敏度:檢測濃度小于0.1 ng/mL。

  3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

  4.  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。


需要而未提供的試劑和器材

  1. 酶標(biāo)儀(450nm)

  2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

  3. 37℃恒溫箱

  4. 蒸餾水或去離子水

 
試劑盒組成

 
名稱96孔配置48孔配置備注
微孔酶標(biāo)板12孔×8條12孔×4條
標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管
樣本稀釋液6mL3mL
檢測抗體-HRP10mL5mL
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
終止液6mL3mL
封板膜2張2張
說明書1份1份
自封袋1個1個
備注:
1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:8、4、2、1、0.5、0.25 ng/mL
2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實驗。


試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

操作步驟
  1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

  2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

  3.   樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

  4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

  5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

  7.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。


實驗結(jié)果計算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

  • 企業(yè)名稱:

    常達(dá)恩生物科技(上海)有限公司

  • 聯(lián)系電話:

    18521031688

  • 公司地址:

    中國(上海)自由貿(mào)易試驗區(qū)臨港新片區(qū)環(huán)湖西二路888號C樓

  • 企業(yè)郵箱:

    1306872766@qq.com

掃碼加微信

Copyright © 2025常達(dá)恩生物科技(上海)有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2024043354號-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登錄    sitemap.xml

一级欧美一级欧美在线播| 东京热男人的天堂一二三区| 亚洲一区二区三区在线免费| 中文字幕在线五月婷婷| 日韩欧美中文字幕人妻| 日本道播放一区二区三区| 色婷婷视频免费在线观看| 欧美黑人暴力猛交精品| 一区二区三区人妻在线| 日韩一区二区三区在线日| 色婷婷在线视频免费播放| 69老司机精品视频在线观看| 亚洲精品一区二区三区日韩| 中文字幕免费观看亚洲视频| 国产欧美另类激情久久久| 日韩精品你懂的在线观看| 中国黄色色片色哟哟哟哟哟哟| 国产熟女一区二区三区四区| 久久热麻豆国产精品视频| 亚洲精品有码中文字幕在线观看| 欧美又黑又粗大又硬又爽| 国产精品午夜福利免费在线| 91亚洲国产成人久久| 亚洲一区二区欧美激情| 日韩性生活视频免费在线观看 | 后入美臀少妇一区二区| 成人精品国产亚洲av久久| 久久热麻豆国产精品视频 | 男人大臿蕉香蕉大视频| 日本在线不卡高清欧美| 粉嫩国产一区二区三区在线| 精品欧美在线观看国产| 很黄很污在线免费观看| 日韩人妻一区中文字幕| 国产欧美日本在线播放| 久久老熟女一区二区三区福利| 中文字幕日韩精品人一妻| 国产精品一区二区三区欧美| 国产免费成人激情视频| 日韩精品一区二区亚洲| 国产日韩欧美在线播放|