国产中文字幕欧美日韩-亚洲精品中文字幕乱女-性感美女激情诱惑一区-色婷婷综合精品三孕妇

技術(shù)文章/ article

您的位置:首頁  -  技術(shù)文章  -  人δ氨基乙酰丙酸(δ-ALA) ELISA檢測試劑盒工作原理

人δ氨基乙酰丙酸(δ-ALA) ELISA檢測試劑盒工作原理

更新時間:2024-11-14      瀏覽次數(shù):346

Humanδ氨基乙酰丙酸(δ-ALA)

ELISA檢測試劑盒

使用說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包δ氨基乙酰丙酸(δ-ALA)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的δ氨基乙酰丙酸(δ-ALA)正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。

2.  標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測。

4.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項

1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。

2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

12孔×8條

12孔×4條

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、15、30、60、120、240 pg/ml

試劑的準備

 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié)果判斷

 繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

 

試劑盒性能

1.  準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

2.  靈敏度:檢測濃度小于1.0 U/L。

3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.  重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.  有效期:6個月

  • 企業(yè)名稱:

    常達恩生物科技(上海)有限公司

  • 聯(lián)系電話:

    18521031688

  • 公司地址:

    中國(上海)自由貿(mào)易試驗區(qū)臨港新片區(qū)環(huán)湖西二路888號C樓

  • 企業(yè)郵箱:

    1306872766@qq.com

掃碼加微信

Copyright © 2025常達恩生物科技(上海)有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2024043354號-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登錄    sitemap.xml

大香蕉久草网一区二区三区| 一区二区三区日本高清| 极品熟女一区二区三区| 又大又长又粗又黄国产| 日韩欧美一区二区黄色| 精品精品国产自在久久高清| 中文字幕乱码免费人妻av| 国产人妻熟女高跟丝袜| 欧美性高清一区二区三区视频| 国产a天堂一区二区专区| 99久久精品久久免费| 午夜精品久久久免费视频| 黄色国产自拍在线观看| 在线欧洲免费无线码二区免费| 欧美中文字幕日韩精品| 国产一级二级三级观看| 激情综合五月开心久久| 国产99久久精品果冻传媒| 东京干男人都知道的天堂| 日韩精品小视频在线观看| 欧美国产精品区一区二区三区| 清纯少妇被捅到高潮免费观看| 小黄片大全欧美一区二区| 国产精品国三级国产专不卡| 护士又紧又深又湿又爽的视频| 日韩精品免费一区二区三区| 亚洲成人黄色一级大片| 国内午夜精品视频在线观看| 日韩综合国产欧美一区| 男人大臿蕉香蕉大视频| 国产精品日韩精品最新| 在线欧洲免费无线码二区免费| 亚洲国产精品久久综合网 | 亚洲中文字幕免费人妻| 老司机精品福利视频在线播放| 免费在线观看激情小视频| 神马午夜福利免费视频| 男女激情视频在线免费观看| 人体偷拍一区二区三区| 国产一级一片内射视频在线| 久久99青青精品免费|